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生物分子相互作用分析系统
2024-11-19 15:05  

 

操作规程

建议在加样前先在 Data Acquisition software 上设计好实验

实验数据收集

1.启动 Octet Data Acquisition Software

桌面上双击Data Acquisition运行操作软件,仪器初始化,1分钟内完成后显示“Ready”状态。

选择Basic Kinetics

点击下一步

2. Plate Definition:

选择样品孔并且定义样品孔

右键更改样品类型,右侧表格中输入样品名称、浓度等信息,分析物必需要有摩尔浓度。

为了校正基线漂移需要包含零浓度

根据设计将样品按序加入样品板

3. Assay Definition:

点击Add添加分析步骤,设置时间和步骤名称

将➔移动至目标步骤,然后在左侧相应的样品位置双击选中样品,添加到Assay steps中,  选择传感器类型

通过Threshold Params控制样品固化信号

3. Sensor Assignment:

传感器类型可右键菜单进行更改。

4. Review Experiment:

通过黑色箭头预览实验步骤,如果需要可返回修改不符合预期的步骤。

5. Run Experiment:

选择结果数据存贮位置(本地电脑)

在仪器开始运行前,确认传感器和样品板是否正确放置。点击GO,开始运行实验。

6. 数据分析

1). Data selection

打开方式①:file→load a folder(数据存贮位置)

打开方式②:通过文件夹路径,找到动力学结果(粉红色),双击load

在loaded的结果中单击打开待分析的结果。

分析传感器选择。

分析步骤,可右键更改实验步骤类型,去掉不需要分析的步骤。例如,association→baseline

2). Processing

step1:data selection中预览原始数据raw data view,在sensor selection进行reference sensor和reference well选择

step2:选择信号扣除方式

step3:Y轴信号归零(通常选择平衡的最后5秒)

step4:选择align to dissociation消除gap

step5:单击process data处理数据。(选中√,数据降噪处理。(结合时间短,结合曲线可能会扭曲)

3). Analysis

1) 选择用于数据分析的步骤,通常结合解离都分析

2) 选择拟合模型

3) 选择local或global拟合,如果是global,通过传感器或颜色进行分组。根据需要选择数据拟合的时间, 单击fit curves拟合数据, 选择export data,导出结果。

7. 关机

从仪器中取出 sensor tray 和 reagent plates。

关闭仪器舱门

退出软件,电脑关机,关闭仪器,清洁台面卫生

注意事项

1. 不要过量固定样品

2. 建议一次实验在3小时内完成  

3. 严禁用手触摸装载传感器的接口顶端的任何部位。

4. 任何机械操作都不能太用力(包括装卸样品、插拔样品杆、操作旋钮和按钮等)。

5. 数据拷贝的方式是刻录光盘,严禁使用u盘。

6. 如果发现仪器有异常情况,须立即向仪器负责人汇报。


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