操作规程

开机程序：

1、检查各液体桶，按需求添加鞘液，倒空废液桶内液体，并在废液桶内添加1/10体积的次氯酸钠溶液

2、开启稳压电源，启动计算机，在出现的登陆对话框中，输入用户名和密码，点击“OK”。

3、开启仪器主电源，打开激光电源。

4、运行BD FACSDiva Software软件，双击桌面上的快捷方式

Software。在出现的登陆对话框中，无需输入用户名和密码，直接点击“OK"。

5、仪器自动联机后，在“Cytometer仪器框”中确认软件已经和仪器相连接即“Cytometer Connected"; 检查此窗口底部的液流系统水平，如果需要，则充满液体或倾空废液。单击工具栏中的“Cytometer(仪器)”按钮，可以显示该窗口。在FACSDiva软件的“Cytometer(仪器)”菜单中，选择“Fluidics Startup(启动液流系统)”选项，按窗口提示步骤进行操作。

6、将气路和液路从乙醇关机液桶上断开，连接到鞘液桶对应的接口上，如图所示，点击done。

7、确认装有O圈的闭合喷嘴在流动检测池上，点击done。

液流启动过程开始，进程提示显示在对话框底部。

8、取下闭合喷嘴，点击done。

9、安装合适口径的喷嘴，保证O圈正确装入喷嘴。可在显微镜下观察喷嘴，确保喷嘴未阻塞。

10、单击OK完成此过程。

11、液流启动完成后，在“Sort(分选)”菜单中选择“Sort Setup(分选设置)"选项，确认设置模式与喷嘴的口径相匹配。

12、开启液流。

a单击工具栏中的 “Sorting(分选)”按钮，可显示断点液流窗口(Break off)和侧液流窗口(Side Stream)。

b单击位于断点液流窗口中“Stream(液流)”按钮，则可以开启液流。

13、打开流动检测池上盖，打开分选区门，检查位于废液吸引器中的液流的位置，并检查断点液流窗口中的液流情况。

正常情况下，液流应顺利从喷嘴流到废液吸引器的中央，且液滴应大小均匀，并按一定的距离相隔排列。

如果发现有液滴滴洒、不稳定或其它异常现象，应单击位于断点液流窗口中“Stream",

关闭液流，重新检查液流情况。

14、关闭分选区门和流动检测池上盖。

关机程序：

1、上含2mL FACS Clean清洗液的流式管高速运行5分钟。

2、同样，上含2mL去离子水的流式管高速运行5分钟。

3、关闭液流。

4、检查废液桶是否已满、乙醇关机桶是否需要补液。

5、从流动检测池取下喷嘴。

6、安装好闭合喷嘴，确认O圈在喷嘴上。

7、在“Cytometer”菜单下选择 “Cleaning Modes(清洗模式)”选项。点击 "Clean Flow ell(清洗流动室)”选项。出现提示框后，在进样管中装约 2ml FACSClean 清洗液，放于载物台上，然后点击OK。

8、在进样管中装入约2ml去离子水，重复上面步骤。

9、在“Cytometer”菜单下选择“Fluidics Shutdown(关闭液流系统)”选项，下列提示信息即出现。

10、从流动检测池取下喷嘴（已完成），点击done。

11、安装好闭合喷嘴，确认O圈在喷嘴上（已完成），点击done。

12、将液路和气路连接到乙醇关机液桶上，如图所示，点击done。

13当您看到“系统可安全关闭”的信息时，点击OK。

14退出BD FACSDiva软件，关计算机

15关闭激光器电源，关闭仪器主电源，关闭稳压电源。

16开鞘液桶压力阀，完全释放压力。

注意事项

1、样前一定要经300目的滤膜过滤。

2、喷嘴一定要拿好, 不要掉在地上或者仪器里面的某个角落, 造成O 形环的磨损。

3、分选过程中不要点其它的界面。